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兔elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫

發(fā)布時(shí)間：2018-07-19   點(diǎn)擊次數(shù)：2521次
 　　兔elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫
　　
　　
　　根據(jù)項(xiàng)目溝通結(jié)果確定制備抗體的種類(lèi)，一般夾心ELISA需要不同表位的抗體用做配對(duì)，建議同時(shí)進(jìn)行多克隆抗體和單克隆抗體的制備。確保的獲得高靈敏度的配對(duì)方式。其他類(lèi)型的ELISA根據(jù)具體情況選擇。
　　
　　1、兔elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫
　　
　　使用部分制備的免疫原免疫2只新西蘭兔和5只BALB/c鼠分別用于多克隆抗體及單克隆抗體的制備。免疫4-5次，收集抗血清檢測(cè)效價(jià)，ELISA效價(jià)大于10萬(wàn)以上進(jìn)行多克隆抗血清收集及單克隆抗體雜交瘤制備。
　　
　　2、兔elisa檢測(cè)試劑盒單克隆抗體雜交瘤制備
　　
　　選擇與重組蛋白和天然蛋白免疫反應(yīng)強(qiáng)的小鼠進(jìn)行細(xì)胞融合，通過(guò)ELISA篩選陽(yáng)性克隆，將陽(yáng)性克隆進(jìn)行亞克隆獲得陽(yáng)性細(xì)胞株。將陽(yáng)性克隆上清進(jìn)行表位鑒定，反應(yīng)性鑒定及親和力鑒定。選擇不同表位，反應(yīng)性強(qiáng)且親和力高的細(xì)胞株進(jìn)行后續(xù)抗體生產(chǎn)。
　　
　　3、兔elisa檢測(cè)試劑盒抗體生產(chǎn)
　　
　　多克隆抗血清進(jìn)行抗原親和純化，獲得特異性抗體10-20mg。
　　
　　單克隆抗體生產(chǎn)選擇所需陽(yáng)性細(xì)胞株進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增，腹水制備，通過(guò)蛋白A親和純化獲得3-5mg純化抗體。
　　
　　
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